Suiwer Saposhnikovia divaricata-olie vir kers- en seepmaak groothandelverspreider essensiële olie nuut vir rietbranderverspreiders

kort beskrywing:

2.1. Voorbereiding van SDE

Die risome van SD is as 'n gedroogde kruid van Hanherb Co. (Guri, Korea) aangekoop. Die plantmateriaal is taksonomies bevestig deur Dr. Go-Ya Choi van die Koreaanse Instituut vir Oosterse Geneeskunde (KIOM). 'n Bewysstukmonster (nommer 2014 SDE-6) is in die Koreaanse Herbarium van Standaard Kruiebronne gedeponeer. Gedroogde risome van SD (320 g) is twee keer met 70% etanol (met 'n 2 uur terugvloei) geëkstraheer en die ekstrak is toe onder verminderde druk gekonsentreer. Die afkooksel is gefiltreer, gevriesdroog en by 4°C gestoor. Die opbrengs van gedroogde ekstrak van ru-uitgangsmateriaal was 48.13% (g/g).

2.2. Kwantitatiewe Hoëprestasie-vloeistofchromatografie (HPLC) Analise

Chromatografiese analise is uitgevoer met 'n HPLC-stelsel (Waters Co., Milford, MA, VSA) en 'n fotodiode-skikkingsdetektor. Vir die HPLC-analise van SDE, die prim-O-glukosielsimifugienstandaard is aangekoop van die Koreaanse Bevorderingsinstituut vir die Tradisionele Medisynebedryf (Gyeongsan, Korea), ensek-O-glukosielhamaudol en 4′-O-β-D-glukosiel-5-O-metielvisamminol is in ons laboratorium geïsoleer en geïdentifiseer deur spektrale analises, hoofsaaklik deur KMR en MS.

SDE-monsters (0.1 mg) is in 70% etanol (10 ml) opgelos. Chromatografiese skeiding is uitgevoer met 'n XSelect HSS T3 C18-kolom (4.6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, VSA). Die mobiele fase het bestaan uit asetonitriel (A) en 0.1% asynsuur in water (B) teen 'n vloeitempo van 1.0 mL/min. 'n Meerstap-gradiëntprogram is soos volg gebruik: 5% A (0 min), 5–20% A (0–10 min), 20% A (10–23 min), en 20–65% A (23–40 min). Die deteksiegolflengte is geskandeer teen 210–400 nm en aangeteken teen 254 nm. Die inspuitvolume was 10.0μL. Standaardoplossings vir die bepaling van drie chromone is voorberei teen 'n finale konsentrasie van 7.781 mg/ml (prim-O-glukosielsimifugien), 31.125 mg/ml (4′-O-β-D-glukosiel-5-O-metielvisaminol), en 31.125 mg/ml (sek-O-glukosielhamaudol) in metanol en by 4°C gehou.

2.3. Evaluering van anti-inflammatoriese aktiwiteitIn Vitro

2.3.1. Selkultuur en monsterbehandeling

RAW 264.7-selle is verkry van die American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, VSA) en gekweek in DMEM-medium wat 1% antibiotika en 5.5% FBS bevat. Selle is in 'n bevogtigde atmosfeer van 5% CO2 by 37°C geïnkubeer. Om die selle te stimuleer, is die medium vervang met vars DMEM-medium, en lipopolisakkaried (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, VSA) by 1μg/mL is bygevoeg in die teenwoordigheid of afwesigheid van SDE (200 of 400μg/mL) vir 'n bykomende 24 uur.

2.3.2. Bepaling van stikstofoksied (NO), prostaglandien E2 (PGE2), tumornekrosefaktor-α(TNF-α), en Interleukien-6 (IL-6) Produksie

Selle is met SDE behandel en vir 24 uur met LPS gestimuleer. NO-produksie is geanaliseer deur nitriet te meet met behulp van die Griess-reagens volgens 'n vorige studie [12]. Afskeiding van die inflammatoriese sitokiene PGE2, TNF-α, en IL-6 is bepaal met behulp van 'n ELISA-kit (R&D-stelsels) volgens vervaardiger se instruksies. Die effekte van SDE op NO- en sitokienproduksie is bepaal by 540 nm of 450 nm met behulp van 'n Wallac EnVision.™mikroplaatleser (PerkinElmer).

2.4. Evaluering van Antiosteoartritis AktiwiteitIn Vivo

2.4.1. Diere

Manlike Sprague-Dawley-rotte (7 weke oud) is aangekoop van Samtako Inc. (Osan, Korea) en gehuisves onder beheerde toestande met 'n 12-uur lig/donker siklus by°C en% humiditeit. Rotte is voorsien van 'n laboratoriumdieet en waterad libitumAlle eksperimentele prosedures is uitgevoer in ooreenstemming met die riglyne van die Nasionale Instituut van Gesondheid (NIH) en goedgekeur deur die Diereversorgings- en Gebruikskomitee van die Daejeon Universiteit (Daejeon, Republiek van Korea).

2.4.2. Induksie van OA met MIA in Rotte

Die diere is ewekansig toegewys en aan behandelingsgroepe toegewys voor die aanvang van die studie (per groep). MIA-oplossing (3 mg/50μL van 0.9% soutoplossing) is direk in die intraartikulêre ruimte van die regterknie ingespuit onder narkose geïnduseer met 'n mengsel van ketamien en xylasien. Rotte is ewekansig in vier groepe verdeel: (1) die soutoplossinggroep sonder MIA-inspuiting, (2) die MIA-groep met MIA-inspuiting, (3) die SDE-behandelde groep (200 mg/kg) met MIA-inspuiting, en (4) die indometasien- (IM-) behandelde groep (2 mg/kg) met MIA-inspuiting. Rotte is oraal SDE en IM toegedien 1 week voor MIA-inspuiting vir 4 weke. Die dosis SDE en IM wat in hierdie studie gebruik is, was gebaseer op dié wat in vorige studies gebruik is [10,13,14].

2.4.3. Metings van Agterpoot Gewigdraende Verspreiding

Na OA-induksie is die oorspronklike balans in die gewigdraende vermoë van die agterpote ontwrig. 'n Onvermoëtoetser (Linton Instrumentation, Norfolk, VK) is gebruik om veranderinge in die gewigdraende toleransie te evalueer. Rotte is versigtig in die meetkamer geplaas. Die gewigdraende krag wat deur die agterpoot uitgeoefen is, is oor 'n tydperk van 3 sekondes gemiddeld. Die gewigsverspreidingsverhouding is bereken deur die volgende vergelyking: [gewig op regteragterpoot/(gewig op regteragterpoot + gewig op linkeragterpoot)] × 100 [15].

2.4.4. Metings van Serum Sitokienvlakke

Die bloedmonsters is vir 10 minute teen 1 500 g by 4°C gesentrifugeer; daarna is die serum versamel en by −70°C gestoor tot gebruik. Die vlakke van IL-1β, IL-6, TNF-α, en PGE2 in die serum is gemeet met behulp van ELISA-kits van R&D Systems (Minneapolis, MN, VSA) volgens die vervaardiger se instruksies.

2.4.5. Kwantitatiewe RT-PCR-analise in reële tyd

Totale RNS is uit kniegewrigweefsel onttrek met behulp van die TRI-reagens® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, VSA), omgekeerd getranskribeer in cDNA en PCR-geamplifiseer met behulp van 'n TM One Step RT PCR-kit met SYBR-groen (Applied Biosystems, Grand Island, NY, VSA). Kwantitatiewe PCR intyds is uitgevoer met behulp van die Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR-stelsel (Applied Biosystems, Grand Island, NY, VSA). Die primervolgordes en die probe-volgorde word in Tabel getoon.1Aliquots van monster-cDNA's en 'n gelyke hoeveelheid GAPDH-cDNA is geamplifiseer met die TaqMan® Universal PCR-meestermengsel wat DNA-polimerase bevat volgens die vervaardiger se instruksies (Applied Biosystems, Foster, CA, VSA). PCR-toestande was 2 min by 50°C, 10 min by 94°C, 15 s by 95°C, en 1 min by 60°C vir 40 siklusse. Die konsentrasie van die teikengeen is bepaal deur die vergelykende Ct (drempelsiklusnommer by kruispunt tussen amplifikasieplot en drempel) metode te gebruik, volgens die vervaardiger se instruksies.

FOB Prys:VS $0.5 - 9,999 / Stuk

Min. Bestelhoeveelheid:100 Stuk/Stukke

Voorsieningsvermoë:10000 Stuk/stukke per maand

Stuur e-pos aan ons

Produkbesonderhede

Produk-etikette

Osteoartritis (OA) is die mees algemene muskuloskeletale afwyking en die mees algemene degeneratiewe gewrigsiekte by bejaardes [1]. OA is 'n toestand wat gedeeltelik veroorsaak word deur besering, verlies van kraakbeenstruktuur en -funksie, en disregulering van pro-inflammatoriese en anti-inflammatoriese weë [2,3Dit beïnvloed hoofsaaklik die artikulêre kraakbeen en subchondrale been van sinoviale gewrigte en lei tot gewrigsversaking, wat lei tot pyn tydens gewigdra, insluitend loop en staan [4].

Daar is geen geneesmiddel vir OA nie, aangesien dit baie moeilik is om die kraakbeen te herstel sodra dit vernietig is.5Die doelwitte van behandeling is om pyn te verlig, gewrigsmobiliteit te handhaaf of te verbeter, die sterkte van die gewrigte te verhoog en die aftakelende effekte van die siekte te verminder. Farmakologiese behandelings van OA is daarop gemik om pyn te verminder om die pasiënt se gewrigsfunksie en lewensgehalte te verhoog. Alhoewel kraakbeenvernietiging die hoofgebeurtenis in OA is, is die afbraak van kollageen die fundamentele gebeurtenis wat die onomkeerbare progressie van OA in samehang met inflammasie bepaal [6,7Behandelings met anti-inflammatoriese en chondrobeskermende aktiwiteit sal na verwagting pyn verlig en matriksintegriteit in OA-pasiënte handhaaf.

Daarom sal die vermindering van inflammasie waarskynlik voordelig wees in OA-bestuur. Onlangse studies dui op beskermende rolle vir kruiebronne op die progressie van OA, in terme van die vermindering van chondrosietinflammasie en verdere kraakbeenvernietiging, deur hul vermoë om met gewrigsverwante weefsels te kommunikeer, wat lei tot die verligting van gewrigspyn [8].

Die wortel vanSaposhnikovia divaricataSchischkin (Umbelliferae) word wyd gebruik in tradisionele medisyne vir die behandeling van hoofpyn, pyn, inflammasie en artritis in Korea en China [9,10Die diverse farmakologiese effekte vanSaposhnikovia divaricata(SD) sluit ook anti-inflammatoriese, pynstillende, koorswerende en antiartritiese eienskappe in [9,11]. 'n Onlangse studie het getoon dat SD-chromoonekstrak potensiële antirumatoïede artritis-effekte in 'n muismodel van kollageen-geïnduseerde artritis besit [10]; min studies is egter uitgevoer om die anti-inflammatoriese en antiartritis-aktiwiteit vanSaposhnikovia divaricatauittreksel (SDE).

Daarom het die huidige studie die anti-inflammatoriese en anti-osteoartritis aktiwiteite van 'n 70% etanolekstrak van SD ondersoek. Eerstens is die anti-inflammatoriese effek van SDE geëvalueer.in vitroin LPS-geïnduseerde RAW 264.7-selle. Vervolgens is die anti-osteoartritis-effek van SDE gemeet deur gewigdraende verspreiding, afbraak van artikulêre kraakbeen en inflammatoriese reaksies in 'n rotmodel van mononatriumjodoasetaat- (MIA-) geïnduseerde OA te bepaal.