Osteoartritis (OA) is een van die langtermyn chroniese degeneratiewe been- en gewrigsiektes wat die bejaarde bevolking ouer as 65 affekteer [
1]. Oor die algemeen word OA-pasiënte gediagnoseer met beskadigde kraakbeen, ontsteekte sinovium en geërodeerde chondrosiete, wat pyn en fisiese nood veroorsaak [
2]. Artritiese pyn word hoofsaaklik veroorsaak deur die degenerasie van kraakbeen in gewrigte deur inflammasie, en wanneer die kraakbeen ernstig beskadig is, kan bene teen mekaar bots, wat ondraaglike pyn en fisiese ontbering veroorsaak.
3Die betrokkenheid van inflammatoriese mediators met simptome soos pyn, swelling en styfheid van die gewrig is goed gedokumenteer. By OA-pasiënte word inflammatoriese sitokiene, wat die erosie van kraakbeen en subchondrale been veroorsaak, in die sinoviale vloeistof aangetref [
4Twee hoofklagtes wat OA-pasiënte oor die algemeen het, is pyn en sinoviale inflammasie. Daarom is die primêre doelwitte van die huidige OA-terapieë om pyn en inflammasie te verminder. [
5Alhoewel die beskikbare OA-behandelings, insluitend nie-steroïdale en steroïdale middels, bewese doeltreffendheid het in die verligting van pyn en inflammasie, het die langtermyngebruik van hierdie middels ernstige gesondheidsgevolge soos kardiovaskulêre, gastro-intestinale en nierdisfunksies [
6Dus moet 'n meer effektiewe medisyne met minder newe-effekte ontwikkel word vir die behandeling van osteoartritis.
Natuurlike gesondheidsprodukte word toenemend gewild omdat hulle veilig en maklik beskikbaar is [
7Tradisionele Koreaanse medisyne het bewese doeltreffendheid teen verskeie inflammatoriese siektes, insluitend artritis [
8]. Aucklandia lappa DC. is bekend vir sy medisinale eienskappe, soos om die sirkulasie van qi te verbeter vir die verligting van pyn en die kalmering van die maag, en word tradisioneel as 'n natuurlike pynstiller gebruik [
9]. Vorige verslae dui daarop dat A. lappa anti-inflammatoriese [ besit ].
10,
11], pynstiller [
12], teenkanker [
13], en gastrobeskermend [
14] effekte. Die verskeie biologiese aktiwiteite van A. lappa word veroorsaak deur sy belangrikste aktiewe verbindings: costunolide, dehydrocostus laktone, dihydrocostunolide, costuslaktone, α-costol, saussurea laktone en costuslaktone [
15]. Vroeëre studies beweer dat kostunolide anti-inflammatoriese eienskappe in lipopolisakkaried (LPS) getoon het, wat die makrofage geïnduseer het deur die regulering van NF-kB en die hitteskokproteïenroete [
16,
17]. Geen studie het egter die potensiële aktiwiteite van A. lappa vir OA-behandeling ondersoek nie. Die huidige navorsing het die terapeutiese effekte van A. lappa teen OA ondersoek deur gebruik te maak van (mononatriumjodoasetaat) MIA en asynsuur-geïnduseerde knaagdiermodelle.
Mononatriumjodoasetaat (MIA) word bekend gebruik om baie van die pyngedrag en die patofisiologiese kenmerke van OA in diere te veroorsaak [
18,
19,
20Wanneer MIA in kniegewrigte ingespuit word, ontwrig dit die chondrosietmetabolisme en veroorsaak dit inflammasie en inflammatoriese simptome, soos kraakbeen- en subchondrale beenerosie, die kardinale simptome van OA [
18]. 'n Kronkelende reaksie wat met asynsuur geïnduseer word, word wyd beskou as die simulasie van perifere pyn in diere waar die inflammatoriese pyn kwantitatief gemeet kan word [
19Die muis-makrofaag-sellyn, RAW264.7, word algemeen gebruik om die sellulêre reaksies op inflammasie te bestudeer. Na aktivering met LPS aktiveer RAW264-makrofage inflammatoriese weë en skei verskeie inflammatoriese tussengangers af, soos TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS en IL-6 [
20Hierdie studie het die anti-nosiseptiewe en anti-inflammatoriese effekte van A. lappa teen OA in MIA-diermodel, asynsuur-geïnduseerde diermodel en LPS-geaktiveerde RAW264.7-selle geëvalueer.
2. Materiaal en Metodes
2.1. Plantmateriaal
Die gedroogde wortel van A. lappa DC. wat in die eksperiment gebruik is, is verkry van Epulip Pharmaceutical Co., Ltd. (Seoul, Korea). Dit is geïdentifiseer deur Prof. Donghun Lee, Dept. van Kruiefarmakologie, Kol. van Koreaanse Geneeskunde, Gachon Universiteit, en die bewysstukmonsternommer is gedeponeer as 18060301.
2.2. HPLC-analise van A. lappa-ekstrak
A. lappa is geëkstraheer met behulp van 'n refluksapparaat (gedistilleerde water, 3 uur by 100 °C). Die geëkstraheerde oplossing is gefiltreer en gekondenseer met behulp van 'n laedrukverdamper. A. lappa-ekstrak het 'n opbrengs van 44.69% gehad na vriesdroging onder −80 °C. Chromatografiese analise van A. lappa is uitgevoer met 'n HPLC gekoppel aan 'n 1260 InfinityⅡ HPLC-stelsel (Agilent, Pal Alto, CA, VSA). Vir chromatiese skeiding is die EclipseXDB C18-kolom (4.6 × 250 mm, 5 µm, Agilent) by 35 °C gebruik. 'n Totaal van 100 mg van die monster is verdun in 10 mL 50% metanol en vir 10 min gesonikeer. Monsters is gefiltreer met 'n spuitfilter (Waters Corp., Milford, MA, VSA) van 0.45 μm. Die mobiele fase-samestelling was 0.1% fosforsuur (A) en asetonitriel (B) en die kolom is soos volg geëlueer: 0–60 min, 0%; 60–65 min, 100%; 65–67 min, 100%; 67–72 min, 0% oplosmiddel B met 'n vloeitempo van 1.0 mL/min. Die effluent is waargeneem by 210 nm met behulp van 'n inspuitvolume van 10 μL. Die analise is in drievoud uitgevoer.
2.3. Dierehuisvesting en -bestuur
Manlike Sprague-Dawley (SD) rotte van 5 weke oud en manlike ICR-muise van 6 weke oud is aangekoop van Samtako Bio Korea (Gyeonggi-do, Korea). Diere is in 'n kamer gehou met konstante temperatuur (22 ± 2 °C) en humiditeit (55 ± 10%) en 'n lig/donker-siklus van 12/12 uur. Die diere is vir meer as 'n week voor die aanvang van die eksperiment aan die gang gesit met die toestand. Diere het 'n ad libitum-toevoer van voer en water gehad. Die huidige etiese reëls vir diereversorging en -hantering by Gachon Universiteit (GIACUC-R2019003) is streng gevolg in alle diere-eksperimentele prosedures. Die studie is ontwerp as 'n ondersoeker-blinde en parallelle proefneming. Ons het die genadedoodmetode gevolg volgens die riglyne van die Diere-eksperimentele Etiekkomitee.
2.4. MIA-inspuiting en -behandeling
Rotte is ewekansig in 4 groepe verdeel, naamlik skyn, kontrole, indometasien, en A. lappa. Nadat hulle met 'n 2% isofluoraan O2-mengsel verdoof is, is die rotte met 50 μL MIA (40 mg/m²; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, VSA) intraartikulêr in die kniegewrigte ingespuit om tot eksperimentele OA te lei. Die behandelings is soos volg uitgevoer: kontrole- en skyngroepe is slegs met die AIN-93G basiese dieet gehandhaaf. Slegs die indometasiengroep is voorsien van indometasien (3 mg/kg) wat in die AIN-93G-dieet geïnkorporeer is, en die A. lappa 300 mg/kg-groep is toegewys aan 'n AIN-93G-dieet aangevul met A. lappa (300 mg/kg). Die behandelings is vir 24 dae vanaf die dag van OA-induksie voortgesit teen 'n tempo van 15-17 g per 190-210 g liggaamsgewig op 'n daaglikse basis.
2.5. Gewigsdraende Meting
Na OA-induksie is die gewigdravermoëmeting van die agterpote van die rotte uitgevoer met die incapacitance-MeterTester600 (IITC Life Science, Woodland Hills, CA, VSA) soos geskeduleer. Die gewigsverspreiding op die agterpote is bereken: gewigdravermoë (%)
