Osteoartritis (OA) is een van die langtermyn chroniese degeneratiewe beengewrigsiektes wat die bejaarde bevolking ouer as 65 affekteer.
1]. Oor die algemeen word OA-pasiënte gediagnoseer met beskadigde kraakbeen, ontsteekte sinovium en geërodeerde chondrocyten, wat pyn en fisiese nood veroorsaak [
2]. Artritiese pyn word hoofsaaklik veroorsaak deur die degenerasie van kraakbeen in gewrigte deur ontsteking, en wanneer die kraakbeen ernstig beskadig is, kan bene met mekaar bots wat ondraaglike pyn en fisiese swaarkry veroorsaak [
3]. Die betrokkenheid van inflammatoriese bemiddelaars met simptome soos pyn, swelling en styfheid van die gewrig is goed gedokumenteer. By OA-pasiënte word inflammatoriese sitokiene, wat die erosie van kraakbeen en subchondrale been veroorsaak, in die sinoviale vloeistof aangetref.
4]. Twee groot klagtes wat OA-pasiënte oor die algemeen het, is pyn en sinoviale inflammasie. Daarom is die primêre doelwitte van die huidige OA-terapieë om pyn en inflammasie te verminder. [
5]. Alhoewel die beskikbare OA-behandelings, insluitend nie-steroïdale en steroïdale middels, bewese doeltreffendheid het om pyn en inflammasie te verlig, het die langtermyngebruike van hierdie middels ernstige gesondheidsgevolge soos kardiovaskulêre, gastro-intestinale en nierdisfunksies [
6]. Dus moet 'n meer effektiewe medisyne met minder newe-effekte ontwikkel word vir die behandeling van osteoartritis.
Natuurlike gesondheidsprodukte word toenemend gewild omdat dit veilig en maklik beskikbaar is [
7]. Tradisionele Koreaanse medisyne het bewese doeltreffendheid teen verskeie inflammatoriese siektes, insluitend artritis [
8]. Aucklandia lappa DC. is bekend vir sy medisinale eienskappe, soos om die sirkulasie van qi te verbeter om pyn te verlig en die maag te kalmeer, en is tradisioneel as 'n natuurlike pynstiller gebruik [
9]. Vorige verslae dui daarop dat A. lappa anti-inflammatoriese [
10,
11], pynstillend [
12], kanker teen [
13], en gastrobeskermende [
14] effekte. Die verskillende biologiese aktiwiteite van A. lappa word veroorsaak deur sy belangrikste aktiewe verbindings: costunolide, dehydrocostus laktoon, dihydrocostustunolide, costuslaktoon, α-costol, saussurea laktoon en costuslaktoon [
15]. Vroeëre studies beweer dat costunolide anti-inflammatoriese eienskappe in lipopolisakkaried (LPS) getoon het, wat die makrofage geïnduseer het deur die regulering van NF-kB en hitteskokproteïenbaan [
16,
17]. Geen studie het egter die potensiële aktiwiteite van A. lappa vir OA-behandeling ondersoek nie. Die huidige navorsing het die terapeutiese effekte van A. lappa teen OA ondersoek deur gebruik te maak van (mononatrium-jodoasetaat) MIA en asynsuur-geïnduseerde knaagdiermodelle.
Monosodium-jodoasetaat (MIA) word bekend gebruik om baie van die pyngedrag en die patofisiologiese kenmerke van OA in diere te produseer [
18,
19,
20]. Wanneer dit in kniegewrigte ingespuit word, versteur MIA die chondrosietmetabolisme en veroorsaak inflammasie en inflammatoriese simptome, soos kraakbeen en subchondrale beenerosie, die kardinale simptome van OA [
18]. Wrikkelreaksie wat met asynsuur geïnduseer word, word algemeen beskou as die simulasie van perifere pyn by diere waar die inflammatoriese pyn kwantitatief gemeet kan word [
19]. Die muismakrofaagsellyn, RAW264.7, word algemeen gebruik om die sellulêre reaksies op inflammasie te bestudeer. By aktivering met LPS, aktiveer RAW264-makrofage inflammatoriese weë en skei verskeie inflammatoriese tussengangers af, soos TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS en IL-6 [
20]. Hierdie studie het die anti-nosiseptiewe en anti-inflammatoriese effekte van A. lappa teen OA in MIA dieremodel, asynsuur-geïnduseerde dieremodel en LPS-geaktiveerde RAW264.7 selle geëvalueer.
2. Materiale en Metodes
2.1. Plantmateriaal
Die gedroogde wortel van A. lappa DC. wat in die eksperiment gebruik is, is verkry van Epulip Pharmaceutical Co., Ltd., (Seoul, Korea). Dit is geïdentifiseer deur prof. Donghun Lee, Dept. van Kruiefarmakologie, Kol. van Koreaanse Geneeskunde, Gachon Universiteit, en die koopbewysmonsternommer is as 18060301 gedeponeer.
2.2. HPLC Analise van A. lappa Uittreksel
A. lappa is met 'n terugvloeiapparaat (gedistilleerde water, 3 uur by 100 °C) onttrek. Die onttrekte oplossing is gefiltreer en gekondenseer met 'n laedrukverdamper. A. lappa-ekstrak het 'n opbrengs van 44.69% gehad na vriesdroging onder -80 °C. Chromatografiese analise van A. lappa is uitgevoer met 'n HPLC gekoppel deur 'n 1260 InfinityⅡ HPLC-stelsel (Agilent, Pal Alto, CA, VSA). Vir chromatiese skeiding is EclipseXDB C18 kolom (4.6 × 250 mm, 5 µm, Agilent) by 35 °C gebruik. 'n Totaal van 100 mg van die monster is verdun in 10 ml 50% metanol en vir 10 min. Monsters is gefiltreer met 'n spuitfilter (Waters Corp., Milford, MA, VSA) van 0.45 μm. Die mobiele fase samestelling was 0.1% fosforsuur (A) en asetonitril (B) en die kolom is soos volg geëlueer: 0-60 min, 0%; 60–65 min, 100%; 65–67 min, 100%; 67–72 min, 0% oplosmiddel B met 'n vloeitempo van 1,0 mL/min. Die uitvloeisel is by 210 nm waargeneem deur 'n inspuitvolume van 10 μL te gebruik. Die ontleding is in drievoud uitgevoer.
2.3. Dierebehuising en -bestuur
Manlike Sprague-Dawley (SD) rotte van 5 weke oud en manlike ICR muise van 6 weke is gekoop van Samtako Bio Korea (Gyeonggi-do, Korea). Diere is in 'n kamer gehou deur konstante temperatuur (22 ± 2 °C) en humiditeit (55 ± 10%) en 'n lig/donker siklus van 12/12 uur te gebruik. Die diere was vir meer as 'n week vertroud met die toestand voordat die eksperiment begin het. Diere het 'n ad libitum-voorraad van voer en water gehad. Die huidige etiese reëls vir diereversorging en -hantering by Gachon Universiteit (GIACUC-R2019003) is streng in alle diere-eksperimentele prosedures gevolg. Die studie is ontwerper-blinde en parallelle verhoor. Ons het die genadedood-metode gevolg volgens die riglyne van die Diere-eksperimentele Etiekkomitee.
2.4. MIA Inspuiting en Behandeling
Rotte is ewekansig in 4 groepe geskei, naamlik skyn, kontrole, indometasien en A. lappa. Omdat die rotte met 2% isofluoraan O2-mengsel verdoof is, is die rotte met 50 μL MIA (40 mg/m; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, VSA) intra-artikulêr in die kniegewrigte ingespuit om tot eksperimentele OA te lei. Die behandelings is soos hieronder uitgevoer: kontrole- en skyngroepe is slegs met AIN-93G basiese dieet onderhou. Slegs die indometasiengroep is voorsien van indometasien (3 mg/kg) wat in AIN-93G-dieet geïnkorporeer is en A. lappa 300 mg/kg-groep is toegewys aan AIN-93G-dieet aangevul met A. lappa (300 mg/kg). Die behandelings is voortgesit vir 24 dae vanaf die dag van OA-induksie teen 'n dosis van 15-17 g per 190-210 g liggaamsgewig op 'n daaglikse basis.
2.5. Gewigdraende meting
Na OA-induksie, is gewigdraende kapasiteitmeting van agterste ledemate van die rotte uitgevoer met die incapacitance-MeterTester600 (IITC Life Science, Woodland Hills, CA, VSA) soos geskeduleer. Die gewigsverspreiding op agterste ledemate is bereken: gewig dra kapasiteit (%)
